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藥靶細(xì)胞株 > kinase激酶細(xì)胞株 > CBP73283c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3
名稱(chēng) c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3
型號(hào) CBP73283
報(bào)價(jià)
特點(diǎn) c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3,母細(xì)胞:BaF3,KIT W557_K558del 導(dǎo)致 Kit 蛋白的近膜結(jié)構(gòu)域(外顯子 11)中從氨基酸 557 到 558(PMID:12918066)的 2 個(gè)氨基酸缺失。 W557_K558del 導(dǎo)致 Kit 的組成型激活和 Erk 磷酸化增加,并導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)中 ETV1 的侵襲性和表達(dá)增加。
  • 詳細(xì)內(nèi)容
I. Background
      c-Kit 基因位于人類(lèi)染色體 4q12-13 區(qū)域,屬于原癌基因,編碼Ⅲ型激酶受體 CD117,其配體為干細(xì)胞因子(SCF)。該基因通過(guò)激活 PI3K、MAPK、JAK-STAT 等信 號(hào)通路,調(diào)控細(xì)胞增殖、分化、存活及凋亡,在造血干細(xì)胞、黑色素細(xì)胞、生殖細(xì)胞等發(fā)育中起關(guān)鍵作用,并參與胚胎發(fā)育、配子形成及免疫細(xì)胞功能。

      c-Kit 異常激活與多種腫瘤相關(guān),如 80%的胃腸道間質(zhì)瘤(GIST)存在 c-Kit 突變,常 見(jiàn)于 11 號(hào)外顯子(如 K642E 突變),導(dǎo)致受體持續(xù)活化,促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng);此外,急性髓 系白血病、黑色素瘤、肥大細(xì)胞增生癥等也可見(jiàn)其突變。靶向藥物可抑制異常 c-Kit 活性,改善患者預(yù)后,尤其在 GIST 中療效顯著。

      在正常生理中,c-Kit 還參與維持組織干細(xì)胞功能及生育能力。其功能缺失突變則可能 引發(fā)斑駁癥等遺傳性疾病。當(dāng)前,c-Kit 仍是癌癥靶向治療的重要靶點(diǎn),相關(guān)藥物研發(fā)持續(xù) 推進(jìn),以療效并克服耐藥性。
 
II. Description
      c-Kit[W557_K558del-V654A] BaF3 藥靶細(xì)胞,通過(guò)轉(zhuǎn)導(dǎo)突變狀態(tài)的 c- Kit[W557_K558del-V654A] 基 因 到 BaF3 細(xì) 胞 系 中 , 穩(wěn) 定 表 達(dá) 人突變形態(tài)下的 c- Kit[W557_K558del-V654A] 基因。

      BaF3(小鼠原 B 細(xì)胞)的生長(zhǎng)和增殖需要 IL-3 的維持。通過(guò)引入各種表達(dá)激酶的基因, 能作為 BaF3 的驅(qū)動(dòng)基因,讓 BaF3 不再依賴(lài) IL-3 而增殖,進(jìn)而激酶基因成為 BaF3 增殖依 賴(lài)的驅(qū)動(dòng)基因,用于評(píng)估小分子藥物對(duì)激酶的靶向抑制作用,原理及流程見(jiàn)下圖所示。


c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

Figure 1. 
c-Kit[W557_K558del-V654A] BaF3 細(xì)胞的構(gòu)建原理圖
 
III. Introduction

Cell Line Name:

c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

Host Cell:

BA/F3

Stability:16 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)

Application:

Anti-proliferation assay and PD assay

Freeze Medium:

90% FBS+10% DMSO

Complete Culture Medium:

RPMI-1640+10%FBS

Mycoplasma Status:

Negative

 
IV. Representative Data

1.WB of c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3 

 Figure 2. WB of c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3.

2.Sanger of c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

Figure 3. c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3 V654A

c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3

Figure 4. c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3 W557_K558del

3. Anti-proliferation assay

c-Kit W557_K558del-V654A/BaF3


Figure 5. CTG Proliferation Assay of  c-Kit [W557_ K558del-V654A] BaF3(C8).

 

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